上期文章我们介绍了间充质干细胞（MSC）对辅助性T细胞Th1和Th17的抑制作用，Th1和Th17的过度活化与很多自身免疫性疾病和炎症反应相关，因此下游用户可以通过不断开发MSC的这一生物学潜能，来攻克上述难治性疾病。

此外，我们也通过详细的数据展示了江南jn体育官方网站开发的这款GMP级MSC无血清培养基培养出的MSC对Th1的抑制率达到89.96%，对Th17的抑制率达到46.9%，是完全不输同类进口产品的。

本期内容我们将继续深挖MSC的免疫抑制与调节能力，用更多数据来展示江南jn体育官方网站GMP级MSC无血清培养基能更好地支持下游用户开展研究。

一、MSC对Treg的促进率

1、实验原理

调节性T细胞（Treg）是一类控制体内自身免疫反应性的T细胞亚群，它由胸腺产生后输出至外周，并通过主动调节的方式抑制存在于正常机体内潜在的自身反应性T细胞的活化与增殖，从而调节机体的免疫力。

大量研究表明，MSC具有促进Treg增殖的作用。有研究报道MSC表面的TLR（Toll样受体）活化后,Notch配体,DL1的表达升高了。CD4+T细胞的Notch信号通路通过细胞接触的机制激活，结果Treg细胞比例升高。

此外，MSC还可以通过细胞间的接触性抑制激活凋亡受体,并分泌前列腺素 E2等可溶性细胞因子引导Th17细胞向Treg细胞转化。研究表明,MSC可以通过促进浆细胞样DC分泌 IL-10 诱导分化Treg细胞。

2、下游应用

Treg细胞的数量减少或功能异常均有可能导致自身免疫病的发生，比如多发性硬化症、活动性类风湿关节炎、I型糖尿病等。因此，可以通过深入开发MSC促进Treg细胞增殖的免疫抑制潜能来改善此类自身免疫疾病。

国内外已有报道，间充质干细胞来源外泌体能在体外诱导单核细胞株THP-1和外周血单核细胞向CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞分化，上调白细胞介素10与转化生长因子β水平，从而促进Treg细胞的增殖和免疫抑制作用。

此外，还有研究表明，Poly (I:C)（一种TLR激动剂）预处理的ADSC（脂肪间充质干细胞）能明显提高移植心脏的存活期，提高脾脏中Treg 细胞含量，减轻急性细胞性排斥反应，这也表明了MSC在器官移植中可以发挥重要作用。

3、江南jn体育官方网站GMP级培养基产出细胞实验结果

通过江南jn体育官方网站的GMP级MSC无血清培养基培养得到的MSC，经过严格的检测，其对Treg细胞的促进率达到了24.58%。

促进率=[(共培养阳-共培养阴)-(单阳-单阴)] / （共培养阳-共培养阴）=24.58%

二、诱导MSC表达IDO

1、实验原理

吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）是MSC细胞内一种含有血红素的酶,可以催化代谢色氨酸产生犬尿氨酸。IDO对需要色氨酸增殖的T细胞产生耐受作用，还在功能静止Treg细胞的激活和调节中起重要作用。

已有实验证实，在MSCs存在时，添加外源性色氨酸可恢复同种抗原激活的T细胞增殖,加入IDO的竞争性抑制剂降低了MSCs 对同种抗原激活的CD4+T淋巴细胞的免疫抑制作用，IDO还参与抑制Th17的分化及FOXP3+Treg的产生。此外,MSCs表达IDO依赖IFN-Γ,实验观察到将 MSCs 置于炎症环境时(如IFN-Γ)可抑制T细胞的增殖。

2、下游应用

IDO是一种胞内酶，广泛表达于机体多种组织器官如肺脏、小肠，胎盘、脾脏、中枢神经系统等，降解必需氨基酸色氨酸，生成犬尿氨酸等代谢产物，在诱导母胎耐受、抗感染、肿瘤免疫、移植耐受等方面起着关键作用。

近年来研究发现细胞因子IFN-Γ、TNF-α可刺激人及小鼠骨髓来源MSC表达 IDO，Toll 样受体3(TLR3)刺激下，MSC表达IDO，表现出免疫抑制作用。

研究发现了由于SLE（系统性红斑狼疮）患者 CD8+T 细胞数量增多，分泌大量 IFN-Γ，后者可促进异基因 MSC 表达大量IDO介导其对CD4+CD25-T 细胞增殖的抑制作用，另一方面，MSC可直接促进SLE 患者外周血CD4+CD25+ Treg 细胞增殖。因此，异基因 MSC 可通过直接或间接的方式上调 SLE 患者 Treg 细胞，诱导免疫耐受治疗疾病。

3、江南jn体育官方网站GMP级培养基产出细胞实验结果

江南jn体育官方网站的GMP级MSC无血清培养基培养得到的MSC，从诱导MSC表达IDO的实验中可以看出：在IFN-Γ和TNF-α的干预下，MSC可以正常表达IDO；作为阴性对照组的第1个条带，MC未处理组不表达IDO；作为阳性对照组的β-actin条带第4组（MSC未处理）和第5组（IFN-Γ处理）都可以正常显示条带。

实验结果表明，江南jn体育官方网站的GMP级MSC无血清培养基培养得到的MSC经诱导表达IDO的能力是正常的。

我们通过上述两个实验进一步验证了江南jn体育官方网站的这款GMP级MSC无血清培养基培养出的间充质干细胞在未经干预的情况下，仍然有着优秀的免疫抑制和调节能力。下游用户在此基础上优化细胞的培养工艺及输送载体，也必能使MSC的免疫调控功能达到更高的水平。

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