2023-02-14
行业热点RNA提取真正需要注意的要点注意以下几点：
1、你的植物组织样品取样和保存正常吗？最近，几个学生把样品磨成粉末，放在-80℃的冰箱里。提取时，试剂盒和trizol都是降解的。事实上，原因很简单。研磨过程破坏细胞壁细胞膜，RNase释放。RNA不能降解吗？因此，取样后，直接冷冻至-80℃，不要研磨；必须研磨成粉末，但必须与裂解液混合，然后冷冻至-80℃。
2、需要注意的是，样品的起始量不应超过裂解液的10%（如50mg样品+500ul裂解液）。一方面，破壁不足，细胞膜裂解不足，RNA不释放到裂解液中，产量肯定不高！另一方面，他们必须释放多少内源性RNase？裂解液不能完全抑制RNase的酶活性，RNA的降解是不可避免的。
3、还有一个非常重要的一点：你的电泳池既跑DNA又跑RNA吗？长期这样做会导致RNase在电泳池中的积累。奇怪的是，它能跑出一条好的条带？
4、液体转移时吸收沉淀吗？吸水相遇到中间层吗？其实只吸80%的清量就够了，RNA纯度会很高，没必要追求高产量，只要能满足下游实验的要求就够了。
