前言
自新冠疫情爆发以来,一次性病毒采样管市场需求量骤增。很多企业在“量”的生产上快马加鞭,但在“质”的研究上浅尝辄止,造成市面上在售的病毒采样管良莠不齐,“假阴性”、“假阳性”的情况此起彼伏。江南jn体育官方网站在病毒采样产品的研发上潜精研思13年,深刻理解优质病毒采样管应具备的特点,深信只有靠产品品质才能与客户搭建起一座坚不可摧的桥梁。于是我们开展了数个验证性实验,与您分享何为一款真正优质的产品。
一直以来江南jn体育官方网站采用辐照方法对病毒采样管进行灭菌,对管材质量要求很高。然而很多企业仍旧采用环氧乙烷灭菌法。环氧乙烷易残留且为致癌物,其残留可能会对使用者的身体造成负面影响,更是会对病毒核酸检测结果产生影响,造成“假阴性”。
验证一: 环氧乙烷对拭子灭菌的方式是否影响核酸检测结果
一:实验材料
拭子:采用江南jn体育官方网站自主研发的口咽植绒拭子作为实验材料。
病毒材料:采用VERO细胞扩培出的PEDV病毒液稀释成高、低两个浓度梯度。
采样管:采用江南jn体育官方网站MT-0501灭活型病毒采样管产品进行病毒采样后的储存。
二:实验步骤
采用环氧乙烷灭菌拭子的方式为实验组,采用辐照灭菌拭子的方式为对照组。
1、将拭子密封包成两包分为实验组和对照组,分别使用两种方式灭菌完成8小时后进行后续操作。
2、病毒液采用江南jn体育官方网站病毒分离无血清培养基稀释成高(1e6copies/mL)、低(1e4 copies/mL)两个浓度梯度。
3、实验组和对照组分别蘸取150ul的病毒液后折断并加入到病毒采样管中,充分振荡混匀后置于室温下放置。
4、12小时后从各管中取出300ul混合液,采用江南jn体育官方网站三步法核酸提取试剂盒提取各组病毒核酸并进行RT-PCR检测。
5、6天之后从各管中取出300ul混合液,采用江南jn体育官方网站三步法核酸提取试剂盒提取各组病毒核酸并进行RT-PCR检测。
三:实验结果
1、12h后观察,环氧乙烷灭菌组的采样液颜色明显变紫,pH值显著增高,证明拭子在采样液中释放残留的环氧乙烷。
检测各组PH值
组别 | PH值 |
无处理 | 7.94 |
辐照低浓度 | 7.93 |
环氧乙烷低浓度 | 8.92 |
辐照高浓度 | 7.92 |
环氧乙烷高浓度 | 8.97 |
2、分别在12小时后和7天后提取各组病毒核酸并进行RT-PCR检测,12小时后检测结果无显著差别,7天后环氧乙烷灭菌组受到显著影响,出现假阴性。
病毒浓度 | 灭菌方式 | Ct值 | |
12小时 | 7天 | ||
低浓度 | 辐照 | 28.52 | 30.05 |
环氧乙烷 | 28.16 | NO Ct | |
高浓度 | 辐照 | 23.04 | 23.39 |
环氧乙烷 | 22.51 | NO Ct |
四:实验结论
环氧乙烷灭菌后的残留会对病毒核酸检测起到抑制作用,造成检测结果呈现假阴性。