你知道吗?核酸检测结果,与病毒采样管的胍盐浓度和提取方式 紧密相关!
胍盐浓度控制不好,很可能导致假阴性情况出现,后果不堪设想哇……
于是江南jn体育官方网站查阅了大量市场资料,并用科学严密的实验过程做出以下相关实验验证,带大家探索江南jn体育官方网站病毒采样管的又一大优势。
那究竟胍盐浓度与提取方式对核酸检测结果的影响是如何的呢?
一:实验材料
1、病毒采样液:原胍盐灭活采样液、增加胍盐2M(中浓度)采样液、增加胍盐4M(高浓度)采样液。
2、病毒浓度:高浓度PEDV病毒(105 copies/mL)、低浓度PEDV病毒(5×103copies/mL)。
3、病毒核酸提取试剂盒:江南jn体育官方网站免裂解核酸提取试剂盒(磁珠法)、G品牌磁珠法核酸提取试剂盒。
二:实验步骤
1、 将稀释好的病毒液以1:9的体积比例添加至不同胍盐浓度的几种采样液中,得到104和500 copies/mL的病毒混合液。
2、 分别采用两种品牌的核酸提取试剂盒对病毒核酸进行提取。
3、对各组病毒核酸进行RT-qPCR检测,比较各组的Ct值。
三:实验结果
G品牌试剂盒提取后各组扩增曲线如下
在高、低两种不同病毒浓度条件下随着胍盐浓度的增大检出的Ct值显著变大
江南jn体育官方网站核酸提取试剂盒提取后各组扩增曲线
在高、低两种不同病毒浓度条件下随着胍盐浓度的增大检出的Ct值无明显变化
四、实验结论
1、病毒采样液中过高的胍盐浓度可能会导致核酸检测环节Ct值变大,在不同品牌的提取试剂盒之间数据差异更显著。
2、较低的病毒浓度下,如果采用较高浓度的胍盐病毒采样液,再搭配上性能较差的核酸提取试剂盒,可能会导致结果的假阴性。